MLPA SUBTELOMÉRICO:¿ES REALMENTE ÚTIL EN DIAGNÓSTICO PRENATAL?

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Durante los últimos cuarenta años, para el estudio de fetos con anomalías ecográficas se ha utilizado la citogenética convencional como la técnica gold standard. Su limitación principal es que no puede detectar desequilibrios cromosómicos menores de 5-10 Mb. Una de las técnicas que se han desarrollado para obtener una mayor resolución es la multiplex ligation-dependant probe amplification (MLPA), una técnica rápida y barata basada en la PCR que puede detectar anomalías numéricas de hasta 50 regiones cromosómicas distintas a la vez. Su utilidad en genética clínica ha quedado bien demostrada, especialmente para la detección de duplicaciones y deleciones subteloméricas.
En estudios postnatales se ha demostrado que un 3-6% de los casos de retraso mental idiopático y otras anomalías congénitas están causados por desequilibrios crípticos de las regiones cromosómicas subteloméricas, y se ha planteado la hipótesis que estos desequilibrios subteloméricos podían ser también responsables de algunas anomalías ecográficas prenatales. Se han realizado diferentes estudios para probar esta hipótesis, en distintas series de fetos con malformaciones y cariotipo normal, hallándose un nivel de detección de desequilibrios subteloméricos que oscila entre el 1,8% y el 5,4%.
Presentamos la serie más amplia de fetos con malformaciones y cariotipo normal analizados mediante MLPA para la detección de desequilibrios subteloméricos, y evaluamos la utilidad de la técnica en estos casos y para caracterizar reordenamientos cromosómicos hallados mediante citogenética convencional.
Se obtuvieron 234 muestras prenatales (biopsia corial, líquido amniótico o sangre fetal), procedentes de 2 grupos: el grupo mayor (229) correspondía a fetos con malformaciones, restricción de crecimiento intrauterino, edema nucal y/o otros marcadores ecográficos y con cariotipo normal; el grupo menor lo constituían 5 fetos con reordenamiento cromosómico visible al microscopio pero de muy difícil caracterización. Se realizó en cada muestra el cariotipo convencional y el estudio mediante MLPA utilizando los kits comerciales SALSA P036 y P070 (MRC-Holland). El kit P036 se usó para detectar deleciones o duplicaciones subteloméricas, y el P070 para confirmar los hallazgos del primer kit. En los casos con ambos kits alterados se realizó FISH con sondas subtelomérica (Vysis) para su confirmación y para el estudio citogenético de los progenitores.
Se detectaron 3 anomalías subteloméricas en el grupo 1 (1,3%): deleción 14qter, deleción 20pter y duplicación X/Ypter. Las deleciones demostraron ser de novo y fueron comprobadas mediante FISH, y ambos embarazos fueron interrumpidos legalmente debido a las graves malformaciones fetales. La duplicación X/Ypter no pudo ser comprobada con FISH, el feto únicamente presentaba restricción severa de crecimiento intrauterino y nació prematuro y sin anomalías fenotípicas.
En el grupo 2, el MLPA detectó desequilibrios subteloméricos en los 5 casos: [1] deleción pter y duplicació qter (cariotipo 46,XX,add(1)(p36.3)), [2] deleción 3pter y duplicación 13qter (cariotipo 46,XY,add(3)(p26)), [3] deleción 6qter (cariotipo 46,XX,add(6)(q27)), [4] deleción 8pter (cariotipo 46,XX,add(8)(p23.3)), y [5] deleción 12qter y duplicación X/Yqter (cariotipo 46,XX,add(12)(q24.33)). Los resultados fueron confirmados mediante FISH con las sondas correspondientes. En los cinco casos el estudio con MLPA de los progenitores resultó normal. Excepto el primer caso, en que nació un bebé con problemas neurológicos severos y que murió al mes de vida, los demás embarazos terminaron en interrupción legal.
La tasa de detección de anomalías subteloméricas en nuestra serie de fetos con malformaciones, restricción de crecimiento intrauterino, edema nucal y/o otros marcadores ecográficos y con cariotipo normal ha sido baja (1,3%) y es similar a la reportada en el estudio previo más amplio realizado en una selección parecida de gestaciones por Shaffer y col. (2008), quienes describieron una tasa del 1,8%. Es importante destacar que de los tres desequilibrios encontrados en nuestra serie, solamente uno de ellos (deleción 14qter) puede relacionarse claramente con el fenotipo fetal. En relación a la deleción 20pter no se han descrito casos prenatales, y la cardiopatía presentada por el feto tampoco ha sido descrita en pacientes con esta deleción. En cuanto a la duplicación X/Ypter, creemos que no se puede relacionar con la restricción de crecimiento fetal. Los resultados obtenidos parecen indicar que las malformaciones fetales, los marcadores ecográficos o la restricción de crecimiento fetal no suelen estar relacionados con desequilibrios subteloméricos relevantes, y en consecuencia el MLPA subtelomérico es de poca utilidad para el estudio de estos casos.
En el segundo grupo de gestaciones, la técnica de MLPA contribuyó a precisar los reordenamientos cromosómicos que habían quedado incompletos mediante el cariotipo convencional, facilitando el consejo genético de las parejas afectadas. En estos casos se pone en evidencia la utilidad de la técnica.