A IMPORTANCIA DA PCR DUPLA NA ELUCIDAÇAO DOS CASOS COM SOROLOGIA DUVIDOSA PARA DOENÇA DE CHAGAS





A IMPORTANCIA DA PCR DUPLA NA ELUCIDAÇAO DOS CASOS COM SOROLOGIA DUVIDOSA PARA DOENÇA DE CHAGAS

(especial para SIIC © Derechos reservados)
A detecção do T. cruzi pela PCR (reação em cadeia da polimerase) em pacientes, tem sido descrita e utilizada em alguns pólos da América Latina, demonstrando ser uma técnica sensível e específica, pois amplifica seqüências alvo do DNA do parasita.
barbosama9.jpg Autor:
Gláucia Eliset Barbosa Marcon,
Columnista Experto de SIIC

Institución:
Faculdade De Ciências Médicas UNICAMP São Paulo, Brasil


Artículos publicados por Gláucia Eliset Barbosa Marcon,
Coautor
Sandra Cecília Botelho Costa – Professora Dou* 
*
Recepción del artículo
26 de Marzo, 2004
Primera edición
24 de Agosto, 2004
Segunda edición, ampliada y corregida
7 de Junio, 2021

Resumen
A doença de Chagas, causada pelo protozoário flagelado Trypanosoma cruzi, afeta cerca de 16 milhões de pessoas na América Latina. Geralmente é diagnosticada utilizando-se métodos sorológicos, não existindo, entretanto, um padrão ouro para o diagnóstico da enfermidade. As técnicas rotineiramente utilizadas para tal diagnóstico são o ELISA (enzime linked immunosorbent assay), a imunofluorescência e a hemaglutinação. Para um paciente ser considerado positivo, deve haver concordância entre as duas sorologias utilizadas. Caso uma das sorologias seja negativa ou limítrofe ao cut-off utilizado, esta é considerada duvidosa, ou seja, não há certeza da infecção pelo T. cruzi. O inquérito epidemiológico, nesses casos é importante, mas não esclarece a presença da infecção, especialmente nos casos crônicos, que apresentem forma indeterminada, sem sintomatologia ou alterações eletrocardiográficas. A detecção do T. cruzi pela PCR (reação em cadeia da polimerase) em pacientes, tem sido descrita e utilizada em alguns pólos da América Latina, demonstrando ser uma técnica sensível e específica, pois amplifica seqüências alvo do DNA do parasita. Este trabalho teve como objetivo principal, demonstrar a eficácia da PCR dupla para o esclarecimento dos casos duvidosos quanto à doença de Chagas. Para tal teste, foi utilizado um fragmento repetitivo do DNA nuclear, que apresenta regiões conservadas para o anelamento de iniciadores na primeira e segunda reação da PCR.

Palabras clave
Reação em cadeia da polimerase (PCR), Trypanosoma cruzi, doença de Chagas, PCR dupla, diagnóstico molecular


Artículo completo

(castellano)
Extensión:  +/-5.81 páginas impresas en papel A4
Exclusivo para suscriptores/assinantes

Clasificación en siicsalud
Artículos originales > Expertos de Iberoamérica >
página   www.siicsalud.com/des/expertocompleto.php/

Especialidades
Principal: Diagnóstico por Laboratorio, Epidemiología
Relacionadas: Atención Primaria, Bioquímica, Infectología, Medicina Interna



Comprar este artículo
Extensión: 5.81 páginas impresas en papel A4

file05.gif (1491 bytes) Artículos seleccionados para su compra



Enviar correspondencia a:
Botelho Costa, Sandra Cecília
Bibliografía del artículo
  1. Pinto Dias JC. Epidemiology of Chagas disease. In Wendel S, Brener Z, Camargo ME & Rassi A. Chagas disease – American Trypanosomiasis: its impact on transfusion and clinical medicine. ISBT Brazil'92, São Paulo, Brazil, 1992.
  2. Chiari E. Chagas disease diagnosis using polymerase chain reaction, hemoculture and serologic methods. Mem Inst Oswaldo Cruz 1999 ; 94 Supl 1: 299 – 300.
  3. Marcon GEB, Andrade PD, Albuquerque DM, Wanderley JS, Almeida EA, Costa SCB, et al. Use of a nested polymerase chain reaction (N-PCR) to detect Trypanosoma cruzi in blood samples from chronic chagasic patients and patients with doubtful serologies. Diagn Microbiol Infect Dis 2002; 43:39-43
  4. Saiki RK, Scharf S, Faloona F, Mullis KB, Horn GT, Erlich HA, et al. Enzimatic amplification of -globin genomic sequences and restriction site analysis for diagnosis of sickle cell anemia. Science 1985; 230: 1350-1354.
  5. Costa FF & Costa SC. Reação em cadeia pela polimerase (PCR): princípios e aplicações clínicas. Rev Bras Reumatol 1992; 3:142-146.
  6. Macina RA, Sánchez DO, Gluschankof DA, Burrone OR, Frash ACC. Sequence diversity in the kinetoplast DNA minicircles of Trypanosoma cruzi. Mol Biochem Parasitology 1986; 21: 25 –32.
  7. Moser DR, Kirchhoff LV, Donelson JE. Detection of T. cruzi by DNA amplification using the polymerase chain reaction. J Clin Microbiol 1989; 27(7): 1477 – 1482.
  8. Wincker P, Bosseno MF, Britto C, Yaksic N, Cardoso MA, Morel CM, et al. High correlation between Chagas disease serology and PCR-based detection of T .cruzi kinetoplast DNA in Bolivian children living in an endemic area. FEMS Microbiol 1994; 124: 419-24.
  9. Wincker P, Britto C, Pereira JB, Cardoso MA, Oelemann W, Morel CM. Use of simplified polymerase chain reaction procedure to detect T. cruzi in blood samples from chronic chagasic patients in a rural endemic area. Am J Trop Med Hyg 1994; 51: 771-777..
  10. Powell SJ. Protocol of Optimization and Reaction Specificity, Chapter 8. In: Newton CR.. PCR: Essencial data. Ed. John Wiley and Sons, 1995.
  11. Costa SC, Miranda SR, Alves G, Rossi CL, Figueiredo LT, Costa FF. Detection of cytomegalovirus infections by PCR in renal transplant patients. Braz J Med Biol Res 1999;32(8): 953-959.
  12. Albuquerque DM, Costa SC. Genotyping of human cytomegalovirus using non radioactive single-strand conformation polymorphism (SSCP) analysis. J Virol Methods 2003; 110(1): 25-28.
  13. Molina RM, Costa SCB, Toro ADC, Silva MTN, Vilela, MMS. Early diagnostic of HIV - 1 infants in Brazil using nested-PCR. J Trop Ped, in press, 2003
  14. Cunha A, Costa FF, Pedro RG, Costa SCB. Detecção do Herpesvírus humano tipo 8 em pacientes com sarcoma de Kaposi. Ver Bras Clin Terap 2000; 26(5); 171-174.
  15. Ochs DE, Hnilica VC, Moser DR, Smith JH, Kirchhoff LV. Postmortem diagnosis of autochthonous acute chagasic myocarditis by polymerase chain reaction amplification of a species-specific DNA sequence of Trypanosoma cruzi. Am J Trop Med Hyg 1996; 54 (5): 526-529.
  16. Sambrook J, Fritsch EF, Maniatis T. Molecular Cloning – A laboratory manual, 2 nd ed. Cold Spring Harbor Laboratory, NY, 1989.
  17. Gomes ML, Macedo AM, Pena SD, Galvão LMC, Chiari E. Chagas' Disease diagnosis: comparative analysis of parasitolologic, molecular and serologic methods. Am J Trop Med Hyg 1999; 60 (2): 205-210.
  18. Britto C, Cardoso MA, Wincker P, Morel CM. A simple protocol for the physical cleavage of Trypanosoma cruzi kinetoplast DNA present in blood samples and its use in polymerase chain reaction (PCR) – based diagnosis of chronic Chagas disease. Mem Inst Oswaldo Cruz 1993; 88(1): 171 –172.
  19. Britto C, Cardoso M.A, Monteiro Vanni C M, Hasslocher Moreno A, Xavier SS, Oelemann W, et al. Polymerase chain reaction detection of Trypanosoma cruzi in human blood samples as a tool for diagnosis and treatment evaluation. Parasitol 1995; 110: 241 – 247.
  20. Ribeiro Dos Santos G, Nishiya EC, Chamone DF, Sáez Alquezar A. An improved PCR-based strategy for the detection of Trypanosoma cruzi in human blood samples. Ann Trop Med Hyg 1999; 93 (7), 689-694.
  21. Junqueira ACV, Chiari E, Wincker P. Comparison of the polymerase chain reaction with two classical parasitological methods for the diagnosis of Chagas disease in an endemic region of northeastern Brazil. Trans R Soc Trop Med Hyg 1996; 90:129-132.
  22. Britto C, Cardoso MA, Ravel C, Santoro A, Borges Pereira J, et al. Trypanosoma cruzi: parasite detection and strain discrimination in chronic chagasic patients from northeastern Brazil using PCR amplification of kinetoplast dna and nonradioactive hybridization. Exp Parasitol 1995; 81: 462-471.
  23. Shikanai-Yasuda M A, Ochs, DE, Tolezano JE, Kirchhoff LV. Use of the polymerase chain reaction for detecting Trypanosoma cruzi in triatomine vectors. Trans R Soc Trop Med Hyg, 1996; 90: 649- 651.
  24. Russomando G, Figueiredo A, Almiron M, Sakamoto M, Morita K. Polymerase chain reaction-based detection of T. cruzi DNA in serum. J Clin Microbiol 1992; 30: 2864-2868.
  25. Russomando G, De Tomassone MC, De Guillen I, Acosta N, Vera N, Almiron M, Candia N, et al. Treatament of congenital Chagas disease diagnosed and followed up by the polymerase chain reaction. Am J Trop Med Hyg 1998; 59 (3): 487-491.
  26. Kirchhoff LV, Votava JR, Ochs, DE, Moser DR. Comparison of PCR and microscopic methods for detecting Trypanosoma cruzi. J Clin Microbiol 1996; 34 (5): 1171-1175.
  27. Gomes M L, Macedo AM, Vago A, Pena SD, Galvão LMC, Chiari E. Trypanosoma cruzi: optimization of polymerase chain reaction for detection in human blood. Exp Parasitol 1998; 88: 28-33.
  28. Britto C, Cardoso MA, Fernandes O, Morel CM. Polymerase chain reaction detection: new insights into the diagnosis of chronic Chagas disease. Mem Inst Oswaldo Cruz 1999; 94 Supl 1: 305 –306.
  29. Portela-Lindoso AAB, SHIKANAI-YASUDA MA. Doença de Chagas: do xenodiagnóstico e hemocultura à reação em cadeia da polimerase. Rev Saúde Pública 2003; 37(1):107-115.
  30. Lages-Silva E, Crema E, Ramires LE, Macedo AM, Pena SD, Chiari E. Relationship between Trypanosoma cruzi in human chagasic megaesophagus: blood and parasitism. Am J Trop Med Hyg 2001; 65(5): 435-441.

Título español
Resumen
 Palabras clave
 Bibliografía
 Artículo completo
(exclusivo a suscriptores)
 Autoevaluación
  Tema principal en SIIC Data Bases
 Especialidades

  English title
  Abstract
  Key words
Full text
(exclusivo a suscriptores)


Autor 
Artículos
Correspondencia
Patrocinio y reconocimiento
Imprimir esta página
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Está expresamente prohibida la redistribución y la redifusión de todo o parte de los contenidos de la Sociedad Iberoamericana de Información Científica (SIIC) S.A. sin previo y expreso consentimiento de SIIC.
ua31618